亚洲国产成人久久精品大牛影视-午夜院线-911亚洲精品-久9视频这里只有精品8-亚欧日韩欧美网站在线看-亚洲国产精品一区二区成人片国内-插女生下面-国产av天堂亚洲国产av麻豆-永久黄网站色视频免费直播-亚洲美女屁股眼交8-有码在线播放-色呦呦视频在线观看-国产精品专区免费观看软件-妓女妓女一区二区三区在线观看-久久精品人妻一区二区三区-少妇高潮太爽了在线视-久久久999久久久-国精产品一区一区三区免费视频-日本成片区免费久久-久久艹网站

戊二醛二步法

1) 原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。

2)標記步驟：

(1) 稱取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室溫靜置過一夜。

(2) 反應后的酶溶液經Sephadex G-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml/1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，則以PEG濃縮至5ml。放置25ml小燒杯中，緩慢攪拌。

(3) 將待標記的抗體12.5mg用生理鹽水稀釋至5ml，攪拌下逐滴加入酶溶液中。

(4) 用1M PH9.5碳酸緩沖液0.25ml，繼續攪拌3?小時。)

(5) 加0.2M賴氨酸0.25ml，混勻后，置室溫2小時。

(6) 在攪拌下逐滴加入等體積飽和硫酸銨，置4℃1小時。

(7) 3000rpm離心半小時，棄上清。沉淀物用半飽和硫酸銨洗二次，zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。

(8) 將上述溶液裝入透析袋中，對0.15M PH7.4的PB緩沖鹽水透析，去除銨離子后(用萘氏試劑檢測)，10,000rpm離心30分鐘去除沉淀，上清液即為酶結合物，分裝后，冰凍保存。